倍性育種，指通過改變?nèi)旧w的數(shù)量，產(chǎn)生不同的變異個體，進而選擇性狀優(yōu)良變異個體培育新品種。正常的配子細胞中所包含的染色體數(shù)或半數(shù)的體細胞染色體數(shù)稱為一套單倍染色體，用符號N表示。具有一個染色體組的細胞和由這樣的細胞組成的個體稱為單倍體(N) ，具有兩個染色體組的細胞或個體稱為二倍體（2N），具有兩個以上整套染色體組的細胞或個體則稱為多倍體，包括三倍體（3N）、四倍體（4N）等。

   傳統(tǒng)的倍性鑒定主要采用常規(guī)壓片法鏡檢統(tǒng)計染色體數(shù)目，但采用這種方法很難尋找到分裂中期染色體分散良好并可進行計數(shù)的細胞，尤其是對于染色體條數(shù)眾多的物種，而且整個過程耗時長，檢測效率低。采用流式細胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）進行倍性分析大大提高了倍性分析的效率，幾分鐘就可以快速準(zhǔn)確檢測同一物種范圍內(nèi)不同倍性的樣品。FCM作為一項快速、高效的檢測技術(shù)，被廣泛應(yīng)用于細胞分類學(xué)、植物遺傳學(xué)及植物生理學(xué)等研究領(lǐng)域中。

實驗原理

  首先通過物理方法使動植物組織（植物一般是葉片，動物一般是血液或者肌肉組織）中的細胞游離出來，再加入裂解液將細胞中的細胞核釋放出來，并打開DNA鏈，然后用DAPI染液將細胞核DNA上的A-T堿基對特異性染色，再用儀器檢測被染色的A-T堿基對發(fā)出的熒光強度，這個熒光強度對應(yīng)的就是一個細胞中DNA的含量。比如二倍體的熒光強度是50（橫坐標(biāo)），那么四倍體的熒光強度就是100（橫坐標(biāo)）。縱坐標(biāo)是細胞數(shù)量的顯示。

實驗方法與檢測設(shè)備

  我們采用配置紫外激光光源的Sysmex-Partec CyFlow倍性分析儀，搭配Sysmex CyStain DAPI倍性分析試劑盒（兩步法）和CellTrics濾網(wǎng)，在2min內(nèi)即可完成一個樣本的檢測，為您提供高效、準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，并出具專業(yè)報告。實驗步驟如下：

1）在裂解液中物理破碎動植物組織，動物組織一般是用剪刀剪碎，植物一般是葉片用鋒利的雙面刀片切碎。不同的組織樣本處理的方法各不相同；

2）將帶有裂解液的破碎的組織樣本過細胞濾網(wǎng)（常用的為sysmex公司的30umCellTrics濾網(wǎng)）過濾以去除未切碎的組織塊；

3）加入4倍裂解液體積的染液，用手指輕彈混勻后上機檢測；

4）收集結(jié)果。

成功檢測案例

  目前我們應(yīng)用這種方法成功檢測倍性的植物有：草莓，蘭花，番茄，水稻，擬南芥，小麥，玉米，牡丹，芍藥，獼猴桃，馬鈴薯，谷子，紫薇，百合，月季，柑橘，枇杷等；動物有各種魚類，海參幼蟲，貝類等。