上海一研生物科技有限公司作�
人腫瘤標志物ELISA檢測試劑盒實驗原�
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� � � | 人腫瘤標志物ELISA檢測試劑�,ELISA試劑� |
- 【資料簡介�
人腫瘤標志物ELISA檢測試劑�是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA�.已知CA724濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將CA724和標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗�,去除未結合的酶結合�,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏�。顏色的深淺和樣品中CA724的濃度呈比例關系�
安全�
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗�
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝��
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份�
操作注意事項
1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室�。稀稀過后的標準品應丟�,不可保��
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質�
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋�。不同批號的試劑不要混用。保質前使用�
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器�
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌�。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品�
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸��
7.底物A應揮�,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光�。避免用手接�,有毒。實驗完成后應立即讀取OD��
8.加入試劑的順序應一�,以保證所有反應板孔溫育的時間一��
9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作�
人腫瘤標志物ELISA檢測試劑盒樣品收�、處理及保存方法
1、血�-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后�1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離�
2、血�-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測�1000×g離心30分鐘去除顆粒�
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物�
4、保�------如果樣品不立即使�,應將其分成小部�-70 ℃保�,避免反復冷�。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解�。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍�人腫瘤標志物ELISA檢測試劑�操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混�。不要使液體產生大量的泡�,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差�
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復�。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔�
3.加入稀釋好后的標準�50ul于反應孔、加入待測樣�50ul于反應孔�。立即加�50ul的標記的抗體。蓋上膜�,輕輕振蕩混��37℃溫�1小時�
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30�,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3�。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次�
5.每孔加�80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混��37℃溫�30分鐘�
6.甩去孔內液�,每孔加滿洗滌液,振�30秒,甩去洗滌�,用吸水紙拍�。重復此操作3�。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一��
7.每孔加入底物A、B�50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫�10分鐘。避免光��
8.取出酶標板,迅速加�50ul終止液,加入終止液后應立即測定結��
9.在450nm波長處測定各孔的OD��
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990�
2. 特異性:不與其它細胞因子反應�
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%�
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1、儀器值:于波�450nm的酶標儀上讀取各孔的OD�
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y�,相應的CA724標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲�,樣品的CA724含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度�
3、檢測值范圍:0-96IU/ml
4�人腫瘤標志物ELISA檢測試劑�敏感度: 0.1 IU/ml
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