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上海莼試生物技�(shù)有限公司作�
� （Monkey� �(huán)氧化�-2 （COX-2� ELISA 檢測(cè)試劑�
| 資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 83968 |
| 下載次數(shù) | 81 | 資料圖片 | 【點(diǎn)擊查看� |
| � � � | 上海莼試生物技�(shù)有限公司 | 需要積� | 0 |
| �(guān) � � | �,�(huán)氧化�-,檢測(cè)試劑� | ||
- 【資料簡(jiǎn)介�
� （Monkey� �(huán)氧化�-2 （COX-2� ELISA 檢測(cè)試劑�
本試劑僅供研究使� �(biāo)本：血�或血�
試驗(yàn)原理�
COX-2試劑盒是固相夾心法酶�(lián)免疫吸附�(shí)�(yàn)�ELISA�.已知COX-2濃度的標(biāo)�(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)�(jìn)行檢�(cè)。先�COX-2�*�(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素�(biāo)記過(guò)�HRP。再�(jīng)�(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底�A�B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中COX-2的濃度呈比例�(guān)系�
試劑盒內(nèi)容及其配�
試劑盒成份（2-8℃保存）
96孔配�
48孔配�
配制
96/48人份酶標(biāo)�
1塊板�96T�
半塊板（48T�
即用�
塑料膜板�
1�
半塊
即用�
�(biāo)�(zhǔn)品：800IU/L
1瓶（0.6ml�
1瓶（0.3ml�
按說(shuō)明書(shū)�(jìn)行稀稀
空白�(duì)�
1瓶（1.0ml�
1瓶（0.5ml�
即用�
�(biāo)�(zhǔn)品稀釋緩沖液
1瓶（5ml�
1瓶（2.5ml�
即用�
*�(biāo)記的�COX-2抗體
1瓶（6ml�
1瓶（3.0ml�
即用�
親和鏈酶�-HRP
1瓶（10ml�
1瓶（5.0ml�
即用�
洗滌緩沖�
1瓶（20ml�
1瓶（10ml�
按說(shuō)明書(shū)�(jìn)行稀�
底物A
1瓶（6.0ml�
1瓶（3.0ml�
即用�
底物B
1瓶（6.0ml�
1瓶（3.0ml�
即用�
終止�
1瓶（6.0ml�
1瓶（3.0ml�
即用�
�(biāo)本稀釋液
1瓶（12ml�
1瓶（6.0ml�
即用�
自備材料
1� 蒸餾水�
2� 加樣器：5ul�10ul�50ul�100ul�200ul�500ul�1000ul�
3� 振蕩器及磁力攪拌器等�
安全�
1� 避免直接接觸終止液和底物A�B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗�
2� �(shí)�(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品�
3� 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份�
操作注意事項(xiàng)
1� 試劑�(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)�(chǔ)存，使用前恢�(fù)到室溫。稀稀�(guò)后的�(biāo)�(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存�
2� �(shí)�(yàn)中不用的板條�(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)�
3� 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批�(hào)的試劑不要混用。保�(zhì)前使用�
4� 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底�A�B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器�
5� 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品�
6� 洗滌酶標(biāo)板時(shí)�(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶�(biāo)反應(yīng)孔中吸水�
7� 底物A�(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)�(shí)間打�(kāi)蓋子。底�B�(duì)光敏感，避免�(zhǎng)�(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)�(yàn)完成后應(yīng)立即讀�OD值�
8� 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反�(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣�
9� 按照�(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的�(shí)間、加液的量及順序�(jìn)行溫育操作�
樣品收集、處理及保存方法
1� 血�-----操作�(guò)程中避免任何�(xì)胞刺激。使用不含熱原和�(nèi)毒素的試管。收集血液后�1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離�
2� 血�-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)�1000×g離心30分鐘去除顆粒�
3� �(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物�
4� 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎�1000×g離心10分鐘，取上清�
5� 保存------如果樣品不立即使用，�(yīng)將其分成小部�-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢�(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍�
試劑的準(zhǔn)�
1� �(biāo)�(zhǔn)品：�(biāo)�(zhǔn)品的系列稀�?xiě)?yīng)在實(shí)�(yàn)�(shí)�(zhǔn)備，不能�(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)�(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中�(jìn)行：
800 IU/L
�6�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品）
原倍濃度不用稀釋直接加�50ul�
400 IU/L
�5�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品）
100ul的原倍標(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
200 IU/L
�4�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品）
100ul�5�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
100 IU/L
�3�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品）
100ul�4�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
50 IU/L
�2�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品）
100ul�3�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
25 IU/L
�1�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品）
100ul�2�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�100ul的標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
0 IU/L
（空白對(duì)照）
原始濃度不用稀釋直接加�50ul�
2� 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾�50倍稀釋�
操作步驟
1� 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體�(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，�(chǎn)生加樣上的誤差�
2� 根據(jù)待測(cè)樣品�(shù)量加上標(biāo)�(zhǔn)品的�(shù)量決定所需的板條數(shù)。每�(gè)�(biāo)�(zhǔn)品和空白孔建議做�(fù)孔。每�(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用�(biāo)本稀釋液1�1稀釋后加入50ul于反�(yīng)孔內(nèi)�
3� 加入稀釋好后的�(biāo)�(zhǔn)�50ul于反�(yīng)孔、加入待�(cè)樣品50ul于反�(yīng)孔內(nèi)。立即加�50ul�*�(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻�37℃溫�1小時(shí)�
4� 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振�30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重�(fù)此操�3次。如果用洗板�(jī)洗滌，洗滌次�(shù)增加一次�
5� 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫�30分鐘�
6� 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振�30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重�(fù)此操�3次。如果用洗板�(jī)洗滌，洗滌次�(shù)增加一次�
7� 每孔加入底物A�B�50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫�10分鐘。避免光照�
8� 取出酶標(biāo)板，迅速加�50ul終止液，加入終止液后�(yīng)立即�(cè)定結(jié)果�
9� �450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值�
建議使用的實(shí)�(yàn)方案
�(biāo)�(zhǔn)品濃度（IU/L�
A
800
800
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
B
400
400
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
C
200
200
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
D
100
100
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
E
50
50
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
F
25
25
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
G
0
0
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
H
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
局�
6�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品以上的�(jié)果為非線性的，根�(jù)此標(biāo)�(zhǔn)曲線�(wú)法得到的�(jié)果�
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與�(yù)期濃度相�(guān)系數(shù)R值為0.990�
2. 特異性：不與其它�(xì)胞因子反�(yīng)�
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系�(shù)均小�10%�
�(jié) � � � � � �
1�儀器值：于波�(zhǎng)450nm的酶�(biāo)儀上讀取各孔的OD�
2、以吸光�OD值為縱坐�(biāo)�Y），相應(yīng)�COX-2�(biāo)�(zhǔn)品濃度為橫坐�(biāo)�X），做得相應(yīng)的曲線，樣品�COX-2含量可根�(jù)�OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線換算出相�(yīng)的濃度�
3�檢測(cè)值范圍：0-800IU/L
4�敏感度： 1.0 IU/L
2024世環(huán)�(huì)【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展�
div6�3日，2024世環(huán)�(huì)【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展】于上海丨國(guó)家會(huì)展中[詳細(xì)]
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