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上海江萊生物科技有限公司作�
�*（FA）酶�(lián)免疫分析（ELISA）說明書 昆明
| 資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 28160 |
| 下載次數(shù) | 68 | 資料圖片 | 【點(diǎn)擊查看� |
| � � � | 上海江萊生物科技有限公司 | 需要積� | 0 |
| �(guān) � � | �*（FA�,Elisa試劑�,酶聯(lián)反應(yīng),江萊生物 | ||
- 【資料簡介�
�*（FA�酶聯(lián)免疫分析�ELISA�
試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使�
目的：本試劑盒用于測��血清，血漿及相關(guān)液體樣本�*（FA��含量�
�(shí)�(yàn)原理�
本試劑盒�(yīng)用雙抗體夾心法測��(biāo)���*（FA�水平。用純化��*（FA�抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入*（FA�，再�HRP�(biāo)記的*（FA�抗體�(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體�(fù)合物，經(jīng)�*洗滌��底物TMB顯色�TMB�HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成�(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中�*（FA�呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀�450nm波長下測定吸光度�OD值）�通過�(biāo)�(zhǔn)曲線�(jì)算樣���*（FA�濃度�
試劑盒組��
試劑盒組�
48孔配�
96孔配�
保存
說明�
1�
1�
封板�
2片（48�
2片（96�
密封�
1�
1�
酶標(biāo)包被�
1×48
1×96
2-8℃保�
�(biāo)�(zhǔn)品：2700ng/L
0.5ml×1�
0.5ml×1�
2-8℃保�
�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1�
1.5ml×1�
2-8℃保�
酶標(biāo)試劑
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
樣品稀釋液
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
顯色�A�
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
顯色�B�
3 ml×1�
6 ml×1�
2-8℃保�
終止�
3ml×1�
6ml×1�
2-8℃保�
濃縮洗滌�
�20ml×20倍）×1�
�20ml×30倍）×1�
2-8℃保�
樣本處理及要��
1. 血清：室溫血液自然凝�10-20分鐘，離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清，保存過程中如出�(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心�
2. 血漿：�(yīng)根據(jù)�(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混�10-20分鐘后，離心20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心�
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照�(shí)行�
4. �(xì)胞培�(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS�PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，�(xì)胞濃度達(dá)�100�/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出�(xì)胞內(nèi)成份。離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心�
5. 組織�(biāo)本：切割�(biāo)本后，稱取重量。加入一定量�PBS�PH7.4。用液氮迅速冷凍保�?zhèn)溆谩�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量�PBS�PH7.4），用手工或勻漿器將�(biāo)本勻漿充分。離�20分鐘左右�2000-3000�(zhuǎn)/分）。仔�(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用�
6. �(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提取，提取按相�(guān)文獻(xiàn)�(jìn)行，提取后應(yīng)盡快�(jìn)行實(shí)�(yàn)。若不能馬上�(jìn)行試�(yàn)，可將標(biāo)本放�-20℃保存，��(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣�，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的�HRP）活性�
操作步驟
1. �(biāo)�(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上�(shè)�(biāo)�(zhǔn)品孔10孔，�*、第二孔中分別加�(biāo)�(zhǔn)�100μl，然后在*、第二孔中加�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后�*孔、第二孔中各�100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)�(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各�50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各�50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都�50μl，濃度分別為1800ng/L�1200ng/L �600ng/L�300ng/L� 150ng/L）�
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）�待測樣品�。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣�10μl（樣品zui終稀釋度�5倍）�加樣將樣品加于酶�(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁�輕輕晃動混勻�
3. 溫育：用封板膜封板后�37℃溫�0分鐘�
4. 配液：將30�48T�20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30�48T�20倍）倍稀釋后備用�
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜�30秒后棄去，如此重�(fù)5次，拍干�
6. 加酶：每孔加入酶�(biāo)試劑50μl，空白孔除外�
7. 溫育：操作同3�
8. 洗滌：操作同5�
9. 顯色：每孔先加入顯色�A50μl，再加入顯色�B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯�15分鐘.
10. 終止：每孔加終止�50μl，終止反�(yīng)（此時藍(lán)色立�(zhuǎn)黃色��
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔�吸光度（OD值）� 測定�(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)�(jìn)行�
注意事項(xiàng)�
1� 試劑盒從冷藏�(huán)境中取出�(yīng)在室溫平�15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存�
2� 濃洗滌液可能會有�(jié)�析出，稀釋時可在水浴中加溫助�，洗滌時不影響結(jié)果�
3� 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其�(zhǔn)確性，以避免試�(yàn)誤差。一次加樣時間控制在5分鐘�(nèi)，如�(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣�
4� 請每次測定的同時做標(biāo)�(zhǔn)曲線，做�(fù)孔。如�(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣�OD值大于標(biāo)�(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)�n倍）后再測定，計(jì)算時請zui�乘以總稀釋倍數(shù)�×n×5）�
5� 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染�
6� 底物請避光保存�
7� �(yán)格按照說明書的操作�(jìn)行，試驗(yàn)�(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準(zhǔn).
8� 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都�(yīng)按傳染物處理�
9� 本試劑不同批號組分不得混用�
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)�
�(jì)��
以標(biāo)�(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)�OD值為縱坐�(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出�(biāo)�(zhǔn)曲線，根�(jù)樣品�OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)�(zhǔn)物的濃度�OD值計(jì)算出�(biāo)�(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品�OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的�(shí)際濃度�
試劑盒性能�
1.樣品線性回歸與�(yù)期濃度相�(guān)系數(shù)R值為0.95以上�
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%�11%
檢測范圍�
100ng/L -2000ng/L
保存條件及有效期�
1.試劑盒保存：�2-8��
2．有效期�6個月
�(chǎn)品優(yōu)惠請登錄�� /st210836
2024世環(huán)會【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展�
div6�3日，2024世環(huán)會【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展】于上海丨國家會展中[詳細(xì)]
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