上海研盟生物科技有限公司 作�
大鼠丙二醛(MDA)說明書
資料類型 | pdf文件 | 資料大小 | 270113 |
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� � � | 大鼠丙二醛(MDA�,說明�,上海博研,生物科技 |
- 【資料簡介�
上海博研
大鼠丙二醛(MDA�實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠丙二醛(MDA)水平。用純化的大鼠丙�
醛(MDA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛( MDA),
再與HRP 標記的丙二醛(MDA)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*�
滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui�
的黃色。顏色的深淺和樣品中的丙二醛(MDA)呈正相關。用酶標儀� 450nm 波長下測�
吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠丙二醛(MDA)濃度�
大鼠丙二醛(MDA�試劑盒組�
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1 � 7 終止� 6ml ×1 �
2 酶標試劑 6ml ×1 � 8 標準品(12nmol/L � 0.5ml×1 �
3 酶標包被� 12�×8 � 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 �
4 樣品稀釋液 6ml ×1 � 10 說明� 1 �
5 顯色劑A � 6ml ×1 � 11 封板� 2 �
6 顯色劑B � 6ml ×1/ � 12 密封� 1 �
大鼠丙二醛(MDA�標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,� NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP )活性�
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋�
6nmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
3nmol/L 4 號標準品 150μl �5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
1.5nmol/L 3 號標準品 150μl �4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
0.75nmol/L 2 號標準品 150μl �3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
0.375 nmol/L 1 號標準品 150μl �2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔�
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加�50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl�
然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度� 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�
3. 溫育:用封板膜封板后� 37℃溫�30 分鐘�
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30秒后棄去,如�
重復5 次,拍干�
6. 加酶:每孔加入酶標試� 50μl,空白孔除外�
7. 溫育:操作同 3�
8. 洗滌:操作同 5�
9. 顯色:每孔先加入顯色� A50 μl,再加入顯色� B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�
15分鐘.
10. 終止:每孔加終止� 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)�
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD值)� 測定應在加終�
液后15分鐘以內進行�
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