上海蔚霆生物科技有限公司作�
大鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA檢測試劑�
資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 221696 |
下載次數 | 6 | 資料圖片 | 【點擊查看� |
� � � | 上海蔚霆生物科技有限公司 | 需要積� | 0 |
� � � | 大鼠丙酮酸脫氫酶,E1(PDH E1�,ELISA檢測試劑� |
- 【資料簡介�
本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診�
大鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1�ELISA檢測試劑�
使用說明�
檢測原理
�劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育�*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)呈正相關。用酶標儀�450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度�
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后�3000轉離�10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離�
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝�3000轉離�30分鐘取上清�
3. 細胞上清液:3000轉離�10分鐘去除顆粒和聚合物�
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎�3000轉離�10分鐘取上清�
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存�-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍�
自備物品
- 酶標儀�450nm�
- 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL�2-20uL�20-200uL�200-1000uL
- 37�恒溫�
操作注意事項
- 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平�20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結�*溶解后再使用�
- 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存�
- 預處理后的樣本無需稀釋,直接�10μL加樣即可�
- 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作�
- 所有液體組分使用前充分搖勻�
試劑盒組�
名稱
96孔配�
48孔配�
備注
微孔酶標�
12�×8�
12�×4�
�
標準品(8 IU/L�
0.6mL
0.6mL
按說明書進行稀�
標準品稀釋液
6mL
3mL
�
*
6mL
3mL
�
檢測抗體-HRP
10mL
5mL
�
20×洗滌緩沖�
25mL
15mL
按說明書進行稀�
底物A
6mL
3mL
�
底物B
6mL
3mL
�
終止�
6mL
3mL
�
封板�
2�
2�
�
說明�
1�
1�
�
自封�
1�
1�
�
注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為�8�4�2�1�0.5�0.25 IU/L.
試劑的準�
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1�20稀釋,�1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水�
洗板方法
- 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次�
- 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸�1min,洗�5次�
操作步驟
- 從室溫平�20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放�4℃�
- 設置標準品孔、樣本孔和空白孔�空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準�50μL�
- 待測樣本孔先加待測樣�10μL,再�*40μL�
- 隨后標準品孔和樣本孔�(空白孔不加�加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min�
- 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)�
- 所有孔加入底物A、B�50μL�37℃避光孵�15min�
- 所有孔加入終止�50μL�15min內,�450nm波長處測定各孔的OD值�
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值�
試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900�
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小�0.1 IU/L�
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應�
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%�
5. 貯藏�2-8℃,避光防潮保存�
6. 有效期:6個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責�
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔�
上海逸峰生物科技有限公司代理不同品牌價格檔次�ELISA試劑盒。數萬種抗體產品�, 品種多,質量好,靈敏度高,價格實惠,并且還提供免費代檢測服務�
本公司的更多產品,請點擊公司�http://www.yfswbio.com/
訂貨�
� 站:http://www.yfswbio.com �yfswbio.cn
上海逸晗生物科技有限公司代理不同品牌價格檔次的ELISA試劑盒。抗體產品等, 品種多,質量好,價格實惠,并且還提供免費代檢測服務�
本公司的更多產品,請點擊公司:http://www.yihanbio.com/
上一篇:葉片式擺動氣缸CRB2系列資料
下一篇:SMC自由型安裝氣缸CU系列
- 凡本網注�"來源:環保在�"的所有作品,版權均屬于環保在線,轉載請必須注明環保在線,http://www.hezebar.com。違反者本網將追究相關法律責任�
- 企業發布的公司新聞、技術文章、資料下載等內容,如涉及侵權、違規遭投訴的,一律由發布企業自行承擔責任,本網有權刪除內容并追溯責任�
- 本網轉載并注明自其它來源的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點或證實其內容的真實性,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品來源,并自負版權等法律責任�
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利�