上海科興商貿(mào)有限公司作�
*G(IgG)酶�(lián)試劑盒使用方�
資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 105984 |
下載次數(shù) | 51 | 資料圖片 | 【點(diǎn)擊查看� |
� � � | 上海科興商貿(mào)有限公司 | 需要積� | 0 |
�(guān) � � | 試劑� |
- 【資料簡(jiǎn)介�
*G(IgG)酶聯(lián)試劑盒使用方�
檢測(cè)范圍� 96T
2.5μg/ml -80μg/ml
使用目的�
本試劑盒用于�(cè)�人血清、血漿及相關(guān)液體樣本�免疫球蛋�G(IgG)含量�
�(shí)�(yàn)原理
本試劑盒�(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中*G(IgG)水平。用純化��-IgG抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋�G(IgG)�再與HRP�(biāo)記的羊抗�抗體�(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體�(fù)合物,經(jīng)�(guò)*洗滌后加底物TMB顯色�TMB�HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成�(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中�免疫球蛋�G(IgG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀�450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度�OD值),通過(guò)�(biāo)�(zhǔn)曲線�(jì)算樣品中�免疫球蛋�G(IgG)濃度�
試劑盒組�
1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1�
7
終止�
6ml×1�
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1�
8
�(biāo)�(zhǔn)品(160μg/ml�
0.5ml×1�
3
酶標(biāo)包被�
12�×8�
9
�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1�
4
樣品稀釋液
6ml×1�
10
�(shuō)明書
1�
5
顯色�A�
6ml×1�
11
封板�
2�
6
顯色�B�
6ml×1/�
12
密封�
1�(gè)
�(biāo)本要�
1.標(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提取,提取按相�(guān)文獻(xiàn)�(jìn)行,提取后應(yīng)盡快�(jìn)行實(shí)�(yàn)。若不能馬上�(jìn)行試�(yàn),可將標(biāo)本放�-20�保存,但�(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢�(cè)含NaN3的樣�,因NaN3抑制辣根�(guò)氧化物酶的(HRP)活性�
操作步驟
- �(biāo)�(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)�(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中�(jìn)行稀釋�
80μg/ml
5�(hào)�(biāo)�(zhǔn)�
150μl的原倍標(biāo)�(zhǔn)品加�150μl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
40μg/ml
4�(hào)�(biāo)�(zhǔn)�
150μl�5�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�150μl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
20μg/ml
3�(hào)�(biāo)�(zhǔn)�
150μl�4�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�150μl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
10μg/ml
2�(hào)�(biāo)�(zhǔn)�
150μl�3�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�150μl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
5μg/ml
1�(hào)�(biāo)�(zhǔn)�
150μl�2�(hào)�(biāo)�(zhǔn)品加�150μl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
- 加樣:分別設(shè)空白孔(空白�(duì)照孔不加樣品及酶�(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)�(zhǔn)孔�待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上�(biāo)�(zhǔn)品準(zhǔn)確加�50μl�待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待�(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度�5倍)�加樣將樣品加于酶�(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃�(dòng)混勻�
- 溫育:用封板膜封板后�37�溫育30分鐘�
- 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
- 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜�30秒后棄去,如此重�(fù)5次,拍干�
- 加酶:每孔加入酶�(biāo)試劑50μl,空白孔除外�
- 溫育:操作同3�
- 洗滌:操作同5�
- 顯色:每孔先加入顯色�A50μl,再加入顯色�B50μl,輕輕震蕩混勻,37�避光顯色15分鐘.
- 終止:每孔加終止�50μl,終止反�(yīng)(此�(shí)�(lán)色立�(zhuǎn)黃色)�
- �(cè)定:以空白空�(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序�(cè)量各孔的吸光度(OD值)� �(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)�(jìn)行�
操作程序總結(jié)�
�(jì)�
以標(biāo)�(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)�OD值為縱坐�(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出�(biāo)�(zhǔn)曲線,根�(jù)樣品�OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)�(zhǔn)物的濃度�OD值計(jì)算出�(biāo)�(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品�OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的�(shí)際濃度�
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出�(yīng)在室溫平�15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌�(shí)不影響結(jié)果�
3.各步加樣均�(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校�(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試�(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘�(nèi),如�(biāo)本數(shù)量多�*使用排槍加樣�
- �(qǐng)每次�(cè)定的同時(shí)做標(biāo)�(zhǔn)曲線,做�(fù)孔。如�(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量�(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)�(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)�n倍)后再�(cè)定,�(jì)算時(shí)�(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)�×n×5)�
- 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�
6.底物請(qǐng)避光保存�
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作�(jìn)行,試驗(yàn)�(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都�(yīng)按傳染物處理�
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用�
10. 如與英文�(shuō)明書有異,以英文�(shuō)明書為準(zhǔn)�
保存條件及有效期
1.試劑盒保存��2-8��
2.有效期�6�(gè)�
2024世環(huán)�(huì)【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展�

div6�3日,2024世環(huán)�(huì)【工�(yè)節(jié)能與�(huán)保展】于上海丨國(guó)家會(huì)展中[詳細(xì)]
- 凡本�(wǎng)注明"�(lái)源:�(huán)保在�"的所有作品,版權(quán)均屬于環(huán)保在線,�(zhuǎn)載請(qǐng)必須注明�(huán)保在線,http://www.hezebar.com。違反者本�(wǎng)將追究相�(guān)法律�(zé)任�
- 企業(yè)�(fā)布的公司新聞、技�(shù)文章、資料下載等�(nèi)容,如涉及侵�(quán)、違�(guī)遭投訴的,一律由�(fā)布企�(yè)自行承擔(dān)�(zé)任,本網(wǎng)有權(quán)刪除�(nèi)容并追溯�(zé)任�
- 本網(wǎng)�(zhuǎn)載并注明自其它來(lái)源的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀�(diǎn)或證�(shí)其內(nèi)容的真實(shí)性,不承�(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶�(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或�(gè)人從本網(wǎng)�(zhuǎn)載時(shí),必須保留本�(wǎng)注明的作品來(lái)源,并自�(fù)版權(quán)等法律責(zé)任�
- 如涉及作品內(nèi)容、版�(quán)等問(wèn)題,�(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本�(wǎng)�(lián)系,否則視為放棄相關(guān)�(quán)利�