人血管緊張素轉化酶ACE試劑盒產品檢��

【資料簡介��

人血管緊張素轉化酶ACE試劑盒產品檢��

本試劑僅供研究使��  標本：血清或血��

試驗原理��
人血管緊張素轉化��ACE試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA��.已知ACE濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將ACE��*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中ACE的濃度呈比例關系��

自備材料

1�� 蒸餾水��

2�� 加樣器：5ul��10ul��50ul��100ul��200ul��500ul��1000ul��

3�� 振蕩器及磁力攪拌器等��

安全��

1�� 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗��

2�� 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品��

3�� 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份��

操作注意事項

1�� 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存��

2�� 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質��

3�� 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用��

4�� 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器��

5�� 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品��

6�� 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水��

7�� 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值��

8�� 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣��

9�� 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作��

樣品收集、處理及保存方法

1�� 血��-----人血管緊張素轉化��ACE操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后��1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離��

2�� 血��-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測��1000×g離心30分鐘去除顆粒��

3�� 細胞上清��---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物��

4�� 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍��

操作步驟

1�� 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差��

2�� 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔��

3�� 加入稀釋好后的標準��50ul于反應孔、加入待測樣��50ul于反應孔內。立即加��50ul��*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻��37℃溫��1小時��

4�� 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振��30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次��

5�� 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫��30分鐘��

6�� 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振��30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次��

7�� 每孔加入底物A、B��50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫��10分鐘。避免光照��

8�� 取出酶標板，迅速加��50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果��

9�� ��450nm波長處測定各孔的OD值��

人血管緊張素轉化��ACE局��

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果��

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990��

2. 特異性：不與其它細胞因子反應��

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%��

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1、儀器值：于波��450nm的酶標儀上讀取各孔的OD��

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的ACE標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的ACE含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度��

3、檢測值范圍：0-40IU/L

4、敏感度�� 0.1 IU/L