上海通蔚生物科技有限公司作�
其它人酶聯免疫分析試劑盒使用說明�
資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 20992 |
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� � � | 人酶聯免疫分析試劑盒,其它人酶聯免疫分析試劑盒使用說明書價�,其它人酶聯免疫分析試劑盒使用說明�* |
- 【資料簡介�
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人 Dectin-1 水平。用純化的人 Dectin-1 抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入 Dectin-1,再� HRP 標記� Dectin-1抗體結合,形成抗�-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB人酶聯免疫分析試劑盒顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中�Dectin-1 呈正相關。用酶標儀� 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算�品中� Dectin-1
濃度
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,� NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性�
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋�
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔�待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加� 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測品 10μl(樣品zui終稀釋度� 5 倍)�人酶聯免疫分析試劑盒加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�
3. 溫育:用封板膜封板后� 37℃溫� 30 分鐘�
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30 秒后棄去,如�重復 5 次,拍干�
6. 加酶:每孔加入酶標試� 50μl,空白孔除外�
7. 溫育:操作同 3�
8. 洗滌:操作同 5�
9. 顯色:每孔先加入顯色� A50μl,再加入顯色� B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止� 50μl,終止反應(此時藍色立轉)�
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)� 測定應在加終�
液后 15 分鐘以內進行�
操作程序總結�
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品�OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD 值計算出�準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數�即為樣品的實際濃度�
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時�控制� 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣�
4� 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD �
大于標準品孔*孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)�
5� 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�
6.底物請避光保存�
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為�.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�
9.本試劑不同批號組分不得混用�
人酶聯免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃�
2.有效期�6 個月
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