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魚γ干擾素(IFN-γ)酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

2015�11�27� 09:45:51人氣�218來源�上海研域儀器設(shè)備有限公�

資料類型doc文件資料大小157696
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� � �上海研域儀器設(shè)備有限公� 需要積�0
�(guān) � �魚γ干擾素(IFN-γ)酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
【資料簡介�

�γ干擾�(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用�
檢測范圍�
96T
3ng/L - 90ng/L
使用目的�
本試劑盒用于測定魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本�γ干擾�(IFN-γ)含量�
�(shí)�(yàn)原理
本試劑盒�(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中�γ干擾�(IFN-γ)水平。用純化的魚γ干擾�(IFN-γ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾�(IFN-γ),再� HRP�(biāo)記的γ干擾�(IFN-γ)抗體�(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體�(fù)合物,經(jīng)�*洗滌后加底物 TB顯色。TB�   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成�(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中�γ干擾�(IFN-γ)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀� 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過�(biāo)�(zhǔn)曲線�(jì)算樣品中�γ干擾�(IFN-γ)濃度�
試劑盒組�
30倍濃縮洗滌液
20ml×1�
6ml×1�
12�×8�
6ml×1�
6ml×1�
6ml×1/�
終止�
6ml×1�
0.5ml×1�
1.5ml×1�
1�
2   酶標(biāo)試劑
�(biāo)�(zhǔn)品(160 ng/L�
�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
3   酶標(biāo)包被�
4   樣品稀釋液
5   顯色� A�
6   顯色� B�
10   說明�
11   封板�
12   密封�
2�
1�
�(biāo)本要��γ干擾�(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
1.標(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提取,提取按相�(guān)文獻(xiàn)�(jìn)行,提取后應(yīng)盡快�(jìn)行實(shí)�(yàn)。若不能馬上�(jìn)行試�(yàn),可將標(biāo)本放�-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,�   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性�
操作步驟
1.  �(biāo)�(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)�(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中�(jìn)行稀釋�
80ng/L
40ng/L
20ng/L
10ng/L
5ng/L
5號標(biāo)�(zhǔn)�
4號標(biāo)�(zhǔn)�
3號標(biāo)�(zhǔn)�
2號標(biāo)�(zhǔn)�
1號標(biāo)�(zhǔn)�
150µl的原倍標(biāo)�(zhǔn)品加�  150µl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
150µl�  5號標(biāo)�(zhǔn)品加�  150µl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
150µl�  4號標(biāo)�(zhǔn)品加�  150µl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
150µl�  3號標(biāo)�(zhǔn)品加�  150µl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
150µl�  2號標(biāo)�(zhǔn)品加�  150µl�(biāo)�(zhǔn)品稀釋液
2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)�(zhǔn)孔待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上�(biāo)�(zhǔn)品準(zhǔn)確加� 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl�然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度� 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�

溫育:用封板膜封板后� 37℃溫�30分鐘�
配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30秒后棄去,如此重�(fù) 5次,拍干�
加酶:每孔加入酶�(biāo)試劑 50µl,空白孔除外�
溫育:操作同 3�
洗滌:操作同 5�
顯色:每孔先加入顯色� A50µl,再加入顯色� B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�15分鐘.
10.終止:每孔加終止�    50µl,終止反�(yīng)(此時藍(lán)色立�(zhuǎn)黃色)�
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)�(jìn)行�
操作程序總結(jié)�
�(jì)算以�(biāo)�(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)� OD值為縱坐�(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出�(biāo)�(zhǔn)曲線,根�(jù)樣品的OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)�(zhǔn)物的濃度�  OD值計(jì)算出�(biāo)�(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品� OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù)�即為樣品的實(shí)際濃度�

注意事項(xiàng)�γ干擾�(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出�(yīng)在室溫平� 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響�(jié)果�
3.各步加樣均�(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其�(zhǔn)確性,以避免試�(yàn)誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘�(nèi),如�(biāo)本數(shù)量多�*使用排槍加樣�
4.請每次測定的同時做�(biāo)�(zhǔn)曲線,做�(fù)孔。如�(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣�  OD值大于標(biāo)�(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)�×n×5)�
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�
6.底物請避光保存�
7.嚴(yán)格按照說明書的操作�(jìn)行,試驗(yàn)�(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都�(yīng)按傳染物處理�
9.本試劑不同批號組分不得混用�
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)�
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃�
2.有效期�6個月

上海研域儀器設(shè)備有限公�作�

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