1590人乳腺癌��(xì)胞來��

【資料簡介��

1590人乳腺癌��(xì)胞來����(xì)胞接收后的操作流程與注意事項��
1、如果細(xì)胞為貼壁��(xì)胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀��(tài)，請將懸浮的��(xì)胞即時離心，��15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)��/瓶繼��(xù)培養(yǎng)3天；同時原培��(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培��(yǎng)3天��3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時實驗室技��(shù)人員會跟進解��
2、貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度（zui高不能超��20%），或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮*消化后，��(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼��(xù)培養(yǎng)
3、生長不均：貼壁��(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
��(xì)胞常��(guī)培養(yǎng)傳代流程1590人乳腺癌��(xì)胞來��（請��(yán)格遵照無菌操作）
1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培��(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，��2-3ml 0.25%*進行消化��(xì)胞（注意把握消化時間，通常控制��1-2min��
2、鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到��(xì)胞漂浮）去掉*，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打��(xì)胞層，盡量把��(xì)胞層吹落，吹��
3、取部分��(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)��/瓶中，添加適��(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培��(yǎng)箱中培養(yǎng)
4、注意培��(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每��2-3次），待��(xì)胞密度達(dá)��80%以后重復(fù)1項操作或者凍��
特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培��(yǎng)，建議添加雙抗培��(yǎng)��
1、收到細(xì)胞后請盡快更換為��15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼��(xù)使用原瓶，請在原瓶培��(yǎng)基中額外添加10%的血清，（原瓶培��(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超��72小時��
2、貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將��(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直��6cm的培��(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)
3、如簽收時出��(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗��
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