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技術中�

猴雌二醇酶聯(lián)免疫分析僅供研究使用

2016�02�03� 12:44:07人氣�162來源�上海酶聯(lián)生物研究所

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� � �上海酶聯(lián)生物研究所 需要積�0
� � �猴雌二醇酶聯(lián)免疫分析僅供研究使用
【資料簡介�

使用目的�

本試劑盒用于測定猴血清、血漿及相關液體樣本中雌二醇(E2)含量�

猴雌二醇酶聯(lián)免疫分析僅供研究使用實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴雌二醇(E2)水平。用純化的猴雌二醇(E2�

抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雌二醇(E2),再與  HRP

標記的雌二醇(E2)抗體結合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物,�(jīng)�*洗滌后加底物

TMB 顯色。TMB � HRP  酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏

色的深淺和樣品中的雌二醇(E2)呈正相關。用酶標儀�   450nm 波長下測定吸光度(OD

值),通過標準曲線計算樣品中猴雌二醇(E2)濃度�

試劑盒組�

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標本放�-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,�   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性�

猴雌二醇酶聯(lián)免疫分析僅供研究使用操作步驟

1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀

釋�

2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔�

待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加� 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl�然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度� 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�

3.溫育:用封板膜封板后� 37℃溫�30分鐘�

4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30秒后棄去,如�

重復 5次,拍干�

6.加酶:每孔加入酶標試� 50µl,空白孔除外�

7.溫育:操作同 3�

8.洗滌:操作同 5�

9.顯色:每孔先加入顯色� A50µl,再加入顯色� B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�

15分鐘.

10.終止:每孔加終止�    50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)�

11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止

液后 15分鐘以內進行�

操作程序總結�

計算以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品�

OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與  OD值計算出�

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù)�

即為樣品的實際濃度�

猴雌二醇酶聯(lián)免疫分析僅供研究使用注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應裝入密封袋中保存�

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果�

3.各步加樣均應使用加樣器,并�(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時�

控制� 5分鐘內,如標本數(shù)量多�*使用排槍加樣�

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD�

大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計

算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)�×n×5)�

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�

6.底物請避光保存�

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀�(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理�

9.本試劑不同批號組分不得混用�

10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準�

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃�

2.有效期�6個月

  

上海酶聯(lián)生物研究所作�

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