紀寧(上海)科研試劑經(jīng)銷商作�
植物己糖激酶(HK)酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
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�(guān) � � | 植物己糖激酶(HK)酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說明書 |
- 【資料簡介�
檢測范圍�96T15mU/L - 480mU/L
植物己糖激�(HK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書使用目的�
本試劑盒用于測定植物血清、血漿及相關(guān)液體樣本中己糖激�(HK)含量�
實驗原理
本試劑盒�(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中植物己糖激� (HK)。用純化的植物己糖激�(HK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入己糖激� (HK),再� HRP 標記的己糖激�(HK)抗體 ,形成抗�-抗原-酶標抗體復合物,�(jīng)�*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB� HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下�(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的己糖激�(HK)呈正相關(guān)。用酶標儀� 450nm 波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中植物己糖激�(HK)濃度�
植物己糖激�(HK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋�
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加� 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣� 10μl(樣品zui終稀釋度� 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻�
3.溫育:用封板膜封板后� 37℃溫�30分鐘�
4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜� 30秒后棄去,如此重� 5次,拍干�
6.加酶:每孔加入酶標試� 50μl,空白孔除外�
7.溫育:操作同 3�
8.洗滌:操作同 5�
9.顯色:每孔先加入顯色� A50μl,再加入顯色� B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�15分鐘.
10.終止:每孔加終止� 50μl,終止反�(yīng)(此時藍色立�(zhuǎn)黃色)�
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進行�
植物己糖激�(HK)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出�(yīng)在室溫平� 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響�(jié)果�
3.各步加樣均�(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘�(nèi),如標本�(shù)量多�*使用排槍加樣�
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物�(zhì)含量過高(樣� OD值大于標準品�*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)�×n×5)�
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�
6.底物請避光保存�
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀�(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都�(yīng)按傳染物處理�
9.本試劑不同批號組分不得混用�
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準�
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃�
2.有效期�6個月
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