上海科順生物科技有限公司作�
牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�
資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 68455 |
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�(guān) � � | 牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑� |
- 【資料簡介�
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)�(xué)診斷�
牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�使用說明�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑� 試劑盒名稱�
牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑� 試劑盒用途�
定量�血�、血漿及相關(guān)液體樣本�趨化因子配體5(CCL5)的含�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�檢測原理�
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶�(lián)免疫吸附法(ELISA�。將�(biāo)準品、待測樣本加入到�(yù)先包�趨化因子配體5(CCL5)透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未�(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時間�,洗滌除去未�(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下�(zhuǎn)化為藍色�(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中趨化因子配體5(CCL5)濃度呈正相關(guān)�450nm波長下測定OD值,根據(jù)�(biāo)準品和樣品的OD�,計算樣本中趨化因子配體5(CCL5)含量�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑� 試劑�組成�
1
酶標(biāo)包被�
12�×8�
7
底物夜A
6mL
2
�(biāo)準品�200ng/ml
0.6mL
8
底物夜B
6mL
3
20倍濃縮洗滌液
20mL
9
終止�
6mL
4
�(biāo)準品稀釋液
6mL
10
說明�
1�
5
*
6mL
11
封板�
1�
6
酶標(biāo)試劑
6mL
12
密封�
1�
備注��(biāo)準品用標(biāo)準品稀釋液依次稀釋為�200�100�50�25�12.5�6.25ng/ml
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�需要而未提供的試劑和器材�
1�37℃恒溫箱
- �(biāo)準規(guī)格酶�(biāo)儀
- 精密移液器及一次性吸�
- 蒸餾�
- 一次性試�
- 吸水�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�操作步驟�
1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平�30分鐘�
2、配液:用蒸餾水�20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液�
3、加�(biāo)準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準品�、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準品孔中加入�(biāo)準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再�*40μL(即樣本稀�5倍);空白對照孔不加�
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min�
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍�,每孔加滿洗滌液,靜�1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍�,如此重�(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板��
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作�50μL,空白對照孔不加�
7、溫育:重復(fù)4的操作�
8、洗板:重復(fù)5的操��
9、顯色:每孔先加入顯色劑A �50μL,再加入顯色劑B� 50μL�37℃避光顯�15min�
10、終止:取出酶標(biāo)�,每孔加終止�50μL,終止反�(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色��
11、測定:以空白孔�(diào)零,在終止后15分鐘�(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)�
12、計算:根據(jù)�(biāo)準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD�,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃�,也可以使用各種�(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑� 樣本要求�
1、樣�不能含疊氮鈉(NaN3�,因�疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑�
2��(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后�(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放�-20℃保�,但�(yīng)避免反復(fù)凍融�
3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆��
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�注意事項�
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準�
2、酶�(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存�
3、建議所有的�(biāo)準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差�
4、牢記樣本已�(jīng)稀�5�,計算結(jié)果乘�5才是樣本實際濃度�
5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為�(biāo)準曲線延伸計算所�,不做為準確定量�(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確�(jié)果(0.1-200ng/ml范圍�(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃��
6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間�
7、為避免交叉污染,標(biāo)準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸�;酶�(biāo)工作��*和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微�;不得重�(fù)使用封板��
8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用�
9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�操作程序總結(jié)�
準備試劑,樣品和�(biāo)準品
加入準備好的樣品和標(biāo)準品�37℃反�(yīng)30分鐘
洗板4次,加入酶標(biāo)試劑�37℃反�(yīng)30分鐘
洗板4�,加入顯色液A、B�37℃顯�15分鐘
加入終止�
15分鐘之內(nèi)讀OD�
計算
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�檢測范圍�
咨詢�
�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑��(guī)格�
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�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�貯藏�
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�牛趨化因子配�5(CCL5)ELISA檢測試劑�有效期�
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