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技�(shù)中心

�5羥色胺(5-HT)酶�(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

2017�05�03� 13:06:40人氣�263�(lái)源:上海酶聯(lián)生物研究所

資料�(lèi)�doc文件資料大小109056
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� � �上海酶聯(lián)生物研究所 需要積�0
�(guān) � ��5羥色胺(5-HT)酶�(lián)免疫分析試劑�
【資料簡(jiǎn)介�

�5羥色�(5-HT)酶聯(lián)免疫分析試劑�僅供研究使用�
檢測(cè)范圍�                                                    96T
80ng/L -2400 ng/L
使用目的�
本試劑盒用于�(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本�5羥色�(5-HT)含量�
�(shí)�(yàn)原理
本試劑盒�(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中�5羥色�(5-HT)水平。用純化的人5羥色�(5-HT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5羥色�(5-HT),再與HRP�(biāo)記的5羥色�(5-HT)抗體�(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體�(fù)合物,經(jīng)�(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成�(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中�5羥色�(5-HT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀�450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)�(biāo)�(zhǔn)曲線�(jì)算樣品中�5羥色�(5-HT)濃度� 
試劑盒組� 

�(biāo)本要� 
1.標(biāo)本采集后盡早�(jìn)行提取,提取按相�(guān)文獻(xiàn)�(jìn)行,提取后應(yīng)盡快�(jìn)行實(shí)�(yàn)。若不能馬上�(jìn)行試�(yàn),可將標(biāo)本放�-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢�(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根�(guò)氧化物酶的(HRP)活性�
操作步驟
1.�(biāo)�(zhǔn)品的稀�?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰�?biāo)�(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中�(jìn)行稀釋�

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白�(duì)照孔不加樣品及酶�(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)�(zhǔn)孔、待�(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上�(biāo)�(zhǔn)品準(zhǔn)確加�50μl,待�(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待�(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度�5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃�(dòng)混勻�
3.溫育:用封板膜封板后�37℃溫�30分鐘�   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜�30秒后棄去,如此重�(fù)5次,拍干�
6.加酶:每孔加入酶�(biāo)試劑50μl,空白孔除外� 
7.溫育:操作同3�
8.洗滌:操作同5�
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯�15分鐘.
10.終止:每孔加終止�50μl,終止反�(yīng)(此�(shí)�(lán)色立�(zhuǎn)黃色)�
11.�(cè)定:以空白空�(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序�(cè)量各孔的吸光度(OD值)� �(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)�(jìn)行�
操作程序總結(jié)�

�(jì)�
  以標(biāo)�(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐�(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出�(biāo)�(zhǔn)曲線,根�(jù)樣品的OD值由�(biāo)�(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)�(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出�(biāo)�(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的�(shí)際濃度� 
�5羥色�(5-HT)酶聯(lián)免疫分析試劑�注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出�(yīng)在室溫平�15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存�
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌�(shí)不影響結(jié)果�
3.各步加樣均�(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校�(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試�(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘�(nèi),如�(biāo)本數(shù)量多�*使用排槍加樣�
4.請(qǐng)每次�(cè)定的同時(shí)做標(biāo)�(zhǔn)曲線,做�(fù)孔。如�(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量�(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)�(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再�(cè)定,�(jì)算時(shí)�(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)�×n×5)�
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染�
6.底物請(qǐng)避光保存�
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作�(jìn)行,試驗(yàn)�(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀�(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都�(yīng)按傳染物處理�
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用�
10. 如與英文�(shuō)明書(shū)有異,以英文�(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)�
�5羥色�(5-HT)酶聯(lián)免疫分析試劑�保存條件及有效期
1.試劑盒保存�2-8℃�
2.有效期�6�(gè)�

上海酶聯(lián)生物研究所作�

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