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參數規格：
產品名稱：轉基因植物NOS終止子PCR檢測試劑盒
產品貨號：CP100005
產品規格：50T
產品分類：熒光-PCR法
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
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二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
伯克氏菌21號染色體開放閱讀框63抗體Human ETS1 ELISA Kit兔子(GSH)免疫試劑盒

孟氏假單胞菌4號染色體開放閱讀框52抗體Human EXOSC1 ELISA Kit兔子睪酮(T)免疫試劑盒

毛胡枝子根瘤菌4號染色體開放閱讀框40抗體Human ETS2 ELISA Kit兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒

居巖牙殖球菌Cullin3抗體Human EXOSC10 ELISA Kit兔子高密度脂蛋白膽固(HDL-C)免疫試劑盒

ATCC 35056分裂周期同源蛋白40抗體Human ETV4 ELISA Kit兔子肝生長因子(HGF)免疫試劑盒

白蘑卷曲螺旋結構域蛋白106抗體Human ETV6(ETS translocation variant 6) ELISA Kit兔子甘油-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)免疫試劑盒

成團泛菌染色質修飾蛋白1A抗體Human EVI2A ELISA Kit兔子干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌葉綠體伴侶蛋白抗體（蘋果）Human ETV5 ELISA Kit兔子二氧化酶(DAO)免疫試劑盒

釀酒酵母分裂周期蛋白20B抗體Human ESRP2 ELISA Kit兔子端粒酶(TE)免疫試劑盒

污黑腐皮殼周期調控蛋白D1抗體Human ESRRB ELISA Kit兔子低密度脂蛋白膽固(LDL-C)免疫試劑盒

東京根霉周期蛋白B1結合蛋白1抗體Human ESX1 ELISA Kit兔子蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒

放射形根瘤菌周期調控因子14A抗體Human ETF1 ELISA Kit兔子蛋白聚糖(ACAN)免疫試劑盒

異常威克漢姆酵母第七號染色體開放閱讀框12抗體Human ETFA ELISA Kit兔子膽固酯轉移蛋白(CETP)免疫試劑盒

副干酪乳桿菌碳酸酐酶11抗體Human ERO1L ELISA Kit兔子單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒

Bacillus aryabhattaiα酪蛋白抗體Human ERP29 ELISA Kit兔子催乳素(PRL/LTH)免疫試劑盒

白鱗馬勃周期調控相關蛋白1Human ERO1LB ELISA Kit兔子促腎上腺皮質激素(ACTH)免疫試劑盒
轉基因植物NOS終止子PCR檢測試劑盒海綿假單胞菌Pseudomonas│pachastrellae 質量規格：>98.0%,BR類風濕因子試劑盒紅-龍膽二糖苷;

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格：>98.0%(HPLC)4000萬IU/g類泛素蛋白ISG15 elisa試劑盒決明素;1,7-Dihydroxy-2,

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：>99%,BR,可用于培養 類白抗原G試劑盒紅景天素;Rhodiosin; Herb

弧菌Vibrio│sp. 質量規格：>97%,BR,無水物類白抗原E試劑盒;2,6-Dihydroxypur

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格：>98.5%,二水合物類白抗原B27試劑盒湖貝甲素;Hupehenine

扁桃擬莖點霉Phomopsis│amygdaliana Canonaco 質量規格：>98.5%,無水,EP雷帕霉素靶蛋白試劑盒黑芥子硫苷酸一水;Sinigrin m

毛殼菌屬Chaetomium│sp. 質量規格：純度>99.0%,BR酪氨酰tRNA合成酶試劑盒旱蓮苷A;Ecliptasaponin

南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質量規格：標準品用于含量測定酪氨酰DNA 磷酸二酯酶1試劑盒花椒酚;Xanthotol

蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種Bacillus│thuringiensis subsp. canadensis de Barjac and Bonn 質量規格：≥98.0%,BR羥化酶試劑盒黃腐酚; Xanthohumo
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標準曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。