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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養的第一代到第十代以內的細胞統稱為原代細胞。

?小鼠視網膜色素上皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠視網膜色素上皮分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力強。視網膜色素上皮（RPE）位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道；主要是由單層色素上皮細胞所構成，排列十分規則。視網膜色素上皮參與循環，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形，細胞分為三部分，即頂部、體部和基底部。視網膜色素上皮細胞無再生能力，細胞死亡后不被替換，而是鄰近的細胞向側面滑動，以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網膜色素上皮位于脈絡膜和光感受器細胞外節之間，是視網膜下腔和脈絡膜血管之間的離子、水、營養物質和代謝終產物轉運通道。視網膜色素上皮參與循環，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠視網膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數的細胞能夠度過“危機"而繼續傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質發生了改變且帶有癌變的特點，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養物經傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養、種類多、價格便宜、無限傳代等優點，也非常容易在培養、凍存中發生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產品：

小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human heat shock factor 1 (HSF-1) ELISA Kit 人熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒

Humanazurocidin,AZUELISAKit 人天青殺素(AZU)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISA試劑盒人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

植物酶(glaminase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

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小鼠高遷移率族蛋白   英文名稱：   High Mobility Group Box protein 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   HMGB1

非凍型拭子DNA保存液（A型）

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非凍型血液DNA保存液（100 mL）

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紅細胞裂解液A型（核酸純化）

紅細胞裂解液B型（流式細胞分析用）

菌體內毒素清除劑

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一步離心式石蠟清除劑

動物DNA提取

96孔板血液DNAout(真空法)（見關聯產品）

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百萬堿基級動物DNAout（見關聯產品）

百萬堿基級血液DNAout（見關聯產品）

A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40 0.1mgA Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β淀粉樣肽1-40(結構改造)

HMGN3重組人 HMGN3 蛋白 (His 標簽) Protein

ECE1 Protein Human 重組人 ECE1 蛋白 (His 標簽)

EDAR Protein Rat 重組大鼠 EDAR 蛋白 (Fc 標簽)

小鼠視網膜色素上皮細胞低密度脂蛋白受體(LDLR)重組蛋白 Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor (LDLR)

ECE1 Protein Human 重組人 ECE1 蛋白 (His 標簽)

LYVE1重組小鼠 LYVE1 / LYVE-1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (Fc 標簽)

EEF1B2重組人 EF1B / EEF1B2 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞培養的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。

7、計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8、培養：置于37℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。